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人参炭疽病菌T-DNA突变体库的构建及分析

文献类型: 中文期刊

作者: 李美仪 1 ; 孙境远 1 ; 宋佳龙 1 ; 梁池嘉 2 ; 丁冠中 2 ; 刘宁 2 ; 刘守安 1 ;

作者机构: 1.吉林大学分子植物病理学实验室

2.中国农业科学院特产研究所

关键词: 人参炭疽病;农杆菌介导转化;突变体;遗传转化

期刊名称: 特产研究

ISSN: 1001-4721

年卷期: 2025 年 47 卷 002 期

页码: 1-5

摘要: 人参炭疽病主要由人参炭疽病菌(Colletotrichum panacicola)引起,是影响人参栽培产业的重要病害之一。T-DNA插入突变体的构建是研究其致病机理的有效手段。本研究通过对根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的人参生炭疽病菌遗传转化体系进行优化,对影响转化效率的主要因子进行单因子条件试验。结果表明,获得最优转化体系为抑制人参炭疽病菌孢子的遗传霉素(G418)浓度为100 μg/m L,人参炭疽病菌分生孢子的浓度为10~5个/m L,农杆菌OD600值为0.9,乙酰丁香酮(AS)浓度为200 μmol/L,共培养时间为48 h;从人参炭疽病菌T-DNA突变体库中,随机挑选8个转化子进行PCR验证,结果均为阳性;经PDA平板10代培养仍具有G418抗性,验证了T-DNA插入片段的遗传稳定性。本研究优化了农杆菌介导的人参炭疽病菌遗传转化体系,初步构建了人参炭疽病菌T-DNA插入突变体库,为人参炭疽病菌的分子致病机理及有效防治提供理论支撑。

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