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H9N2亚型禽流感病毒NP蛋白纳米抗体的筛选与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 梁世蕊 1 ; 吉艳红 1 ; 王丹 1 ; 朱启运 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 禽流感病毒;H9N2亚型;核蛋白;纳米抗体;特性鉴定

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年 010 期

页码： 1216-1222

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以H9N2亚型禽流感病毒（AIV）为研究对象，将病毒灭活纯化后免疫羊驼，测得其血清抗体效价为1∶128 000；提取羊驼外周血淋巴细胞RNA，获得单个重链可变区（VHH）基因，成功构建H9N2亚型AIV的纳米抗体噬菌体展示文库，文库库容量为1.3×10~9cfu/mL，阳性率为100%；以H9N2亚型AIV-NP蛋白为靶向抗原，利用噬菌体展示技术进行筛选，获得3株靶向H9N2亚型AIV-NP蛋白的纳米抗体；构建纳米抗体真核表达重组质粒，表达纯化后收获3株纳米抗体；通过间接ELISA、Western-blot、间接免疫荧光试验对纳米抗体的亲和力、特异性等生物活性进行鉴定，最终得到1株广谱性高亲和力的H9N2亚型AIV-NP蛋白纳米抗体，可为检测方法的建立提供新的生物材料。

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