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犬细小病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 秦彤 1 ; 周灵 2 ; 由欣月 2 ; 梁琳 2 ; 史利军 2 ; 张建伟 2 ; 李金祥 2 ; 崔尚金 2 ;

作者机构： 1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

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关键词： 犬细小病毒;VP2基因;纳米PCR;临床检测

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2019 年 006 期

页码： 1268-1274

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立灵敏、快速的犬细小病毒(CPV)检测方法,本研究针对CPV VP2基因保守序列设计一对能扩增574 bp片段的特异性引物,对纳米PCR的退火温度、引物浓度等反应条件进行了优化,并对其特异性和灵敏度进行了评估.结果表明,所建立的纳米PCR特异性和灵敏性良好,最低核酸检出量为2拷贝·μL-1,其敏感性比常规PCR高1 000倍.分别采用纳米PCR和常规PCR,对广西、北京、吉林送检的75份疑似CPV的临床样品进行检测,CPV阳性率分别为89.3%(67/75)和70.7%(53/75),表明该方法具有更高的敏感性,适用于CPV低含量临床样品的检测.本方法的建立为CPV感染的早期快速、灵敏、准确的诊断提供了新方法,为CPV的防控奠定基础,具有重大的临床应用意义和价值.

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