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泡桐遗传转化系统的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 戴群 1 ; 何放亭 2 ;

作者机构: 1.山东大学生命学院

2.中国农科院植保所

关键词: 泡桐;农杆菌;遗传转化;离体再生芽

期刊名称: 山东大学学报(自然科学版)

ISSN: 0559-7234

年卷期: 1999 年 03 期

页码: 93-99

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 通过农杆菌 Ti 质粒介导,将模式基因( 新霉素磷酸转移酶+ β葡萄糖酸苷酶基因) 导入泡桐,并对影响转化及选择再生的一系列因子进行优化,创建了泡桐的遗传转化系统.优化后的系统为:用泡桐完整叶片作外植体,侵染转化的菌液浓度 O D600 值控制在0 .1 ~0 .2 ,经20 m m ol/ L Ca2 + 处理,共培养6d ;在10m g/ L 卡那霉素+ 250 m g/ L 羧苄青霉素的选择压下培养数天,随后在仅含 Kan的选择压下继续培养,直至抗性芽的再生.通过此遗传转化系统,获得了抗 Kan的泡桐芽,转化频率可达84 % .组织化学法检测表明, G U S 报告基因不仅在侵染的叶片中得到短暂表达,而且在抗性芽和抗性愈伤组织中得到稳定表达

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