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猪丁型冠状病毒S1-CTD相互作用宿主蛋白的筛选和鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 汤荣锋 1 ; 范前进 1 ; 郭龙军 1 ; 张鑫 1 ; 石达 1 ; 时洪艳 1 ; 陈建飞 1 ; 冯力 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

关键词： 猪丁型冠状病毒;S1-CTD蛋白;相互作用;KIFBP

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2022 年 53 卷 007 期

页码： 2260-2267

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪丁型冠状病毒纤突蛋白S1亚基C端结合域(S1-CTD)是诱导中和抗体产生的主要区域,为研究与其相互作用的宿主蛋白,采用HEK-293T真核表达系统表达并纯化了 S1-CTD,提取了猪回肠上皮细胞膜蛋白,通过免疫共沉淀筛选了可能与S1-CTD相互作用的蛋白并进行质谱分析,发现32个疑似相互作用的宿主蛋白.构建其中可能与S1-CTD互作的蛋白KIF1 binding protein(KIFBP)的真核表达质粒,通过免疫共沉淀和激光共聚焦验证上述宿主蛋白与S1-CTD是否存在相互作用,结果表明KIFBP和S1-CTD之间存在相互作用,共同转染时在细胞质共定位.进一步研究表明,过表达KIFBP能够有效降低病毒RNA水平和病毒滴度,其中mRNA水平降低了约70%,病毒滴度降低了 101.6TCID50.综上,本研究筛选并鉴定出一种与PDCoV S1-CTD相互作用的宿主蛋白KIFBP,为了解PDCoV的致病机制提供了理论基础.

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