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甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶SeCDA7的表达与结合活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 张伟 1 ; 毕扬 2 ; 赵丹 3 ; 宗召莉; 郭巍;

作者机构： 1.北京农学院植物科学技术学院,北京,102206

2.河北农业大学植物保护学院,保定,071001

3.中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081

关键词： 甜菜夜蛾;几丁质脱乙酰酶SeCDA7;外源表达;组织定位分析;几丁质结合活性

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2019 年 35 卷 8 期

页码： 111-117

摘要： 几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA)是昆虫几丁质代谢酶系中的重要组分,是害虫防治的重要靶标.通过RT-PCR技术克隆得到编码甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶secda7基因(GenBank登录号为MG604929),该基因长1431 bp,包含开放阅读框长1134 bp,SeCDA7蛋白的预测分子量分别为43.156 kD.结构域分析显示,SeCDA7具有一个多聚糖乙酰基转移酶催化区,属于第Ⅴ类CDA蛋白.分别构建了原核和真核重组表达载体,利用大肠杆菌和Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统转染Sf9昆虫细胞,成功表达了SeCDA7蛋白,纯化SeCDA7蛋白并分析几丁质结合活性,结果表明SeCDA7蛋白具有几丁质结合活性;荧光定量PCR结果显示secda7基因主要在中肠组织表达.本研究实现了甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶基因secda7的外源表达,并鉴定出SeCDA7蛋白具有几丁质结合活性,为深入探究甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶的生理功能提供了理论依据.

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