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猪IL-21的真核表达及其与CD40L共刺激抗体分泌的活性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 杨贝贝 1 ; 符芳; 薛美; 冯力; 刘平黄;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

关键词： 猪IL-21;真核表达;蛋白纯化;抗体分泌

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 5 期

页码： 501-504,533

摘要： 为研究猪白介素21 (IL-21)的生物学功能,本研究在猪IL-21基因(456 bp)的3'端加上猪Ig G Fc标签序列后,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建重组质粒pcDNA-IL-21-Fc.将该重组质粒转染293T细胞瞬时表达后,利用protein A亲和纯化介质纯化转染上清中的目的蛋白,并检测其纯度与生物学活性.结果显示,构建的重组质粒pcDNA-IL-21-Fc能够在293T细胞中表达相对分子量约为44 ku的猪IL-21融合蛋白;亲和纯化后的猪IL-21融合蛋白能够与CD40L协同呈剂量依懒性地刺激猪外周血淋巴细胞(PBMCs)分泌Ig G.本研究为进一步探究猪IL-21在适应性免疫应答中的作用提供依据.

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