文献类型： 中文期刊
作者： 张志林 1 ; 齐静茹 2 ; 尚瑞沙; 陈红丽; 张轶岭; 沈中元;
作者机构： 1.江苏科技大学生物技术学院
2.中国农业科学院蚕业研究所
关键词： 家蚕微孢子虫;丙酮酸激酶;基因克隆;生物信息学分析;表达谱
期刊名称： 蚕业科学
ISSN： 0257-4799
年卷期： 2019 年 2 期
页码： 212-217
摘要： 丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)在糖酵解最后一步起着不可逆的作用,可以催化磷酸烯醇式丙酮酸将高能磷酸基团转移给ADP生成ATP和丙酮酸.通过在NCBI和家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)数据库中对丙酮酸激酶基因的比对分析,选择家蚕微孢子虫丙酮酸激酶M2亚型的一个基因(NbPK-2,GenBank登录号EOB11679.1)进行克隆.生物信息学分析显示,该基因序列长度为1 359 bp,包含一个完整的开放阅读框,编码452个氨基酸,预测蛋白质等电点为7.13,相对分子质量为51.7 kD,没有信号肽;NbPK-2蛋白的二级结构预测显示其含有38%的螺旋、21%的延伸片段和40%无规则卷曲.通过qRT-PCR检测感染微孢子虫后家蚕不同发育时期的NbPK-2表达水平,发现该基因在感染后24 h内处于相对较高的表达水平,而此后表达水平开始降低,至144 h达到最低值,在168 h又有所升高.研究结果可促进对家蚕微孢子虫糖酵解途径的研究,为家蚕微粒子病的防控奠定理论基础.
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