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O型口蹄疫病毒样颗粒编码基因的真核表达载体构建及表达

文献类型： 中文期刊

作者： 李淑萍 1 ; 孙世琪 2 ; 莫亚霞; 胡永浩; 郭慧琛;

作者机构： 1.甘肃农业大学动物医学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疾病病原生物学国家重点实验室OIE/国家口蹄疫参考实验室

关键词： 口蹄疫病毒;重组真核表达载体;pVAX-VP0VP1VP3构建和表达;病毒样颗粒

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2019 年 1 期

页码： 1-6

摘要： 为了构建O型口蹄疫病毒(FMDV)病毒样颗粒编码基因的真核表达载体,将FMDV结构蛋白VP0、VP1、VP3的基因分别克隆到真核表达载体pVAX1中,再分别通过带有BsmBⅠ、EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的引物,分别对重组质粒pVAX-VP0、pVAX-VP1和pVAX-VP3扩增后进行酶切,用T4连接酶连接得到重组的真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3.对重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3进行PCR鉴定并测序.用脂质体将重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3转染BHK-21细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)及Western blot检测重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3在细胞中的表达情况.结果表明,成功构建了重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3,并在BHK-21细胞中得到表达.

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