文献类型： 中文期刊

作者： 张继燕 ¹ ; 李伟伟 ² ; 范许许 ² ; 曹雪静 ³ ; 朱兆宇 ⁴ ; 裴丹诗 ³ ; 王一卓 ³ ; 何路 ² ; 李熙忠 ⁴ ; 任青峰 ³ ; 张伟 ² ; 王川 ¹ ; 郑海学 ² ;

作者机构： 1.甘肃农业大学动物医学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室

3.河南农业大学动物医学院

4.甘肃农业大学生命科学技术学院

关键词： METTL3;m6A修饰;口蹄疫病毒

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年 008 期

页码： 1010-1018

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用CRISPR/Cas9系统构建了METTL3基因敲除细胞系（BHK-21），随后用口蹄疫病毒（FMDV）分别感染野生型和METTL3敲除BHK-21细胞，通过q PCR、Western-blot和TCID50方法检测FMDV在上述2株细胞中的复制情况。结果表明，敲除METTL3显著抑制FMDV的复制。为了进一步验证METTL3的表型功能，利用慢病毒包装系统构建METTL3稳定表达细胞系。用FMDV分别感染野生型和METTL3过表达BHK-21细胞，通过q PCR和TCID50试验测定FMDV在这2株细胞中的复制情况。结果显示，过量表达METTL3促进FMDV的复制。此外，激光共聚焦显微镜试验显示，FMDV感染BHK-21细胞后，METTL3从细胞核迁移至细胞质，其细胞定位的改变表明METTL3可能参与调控FMDV基因组的转录过程。本研究中成功构建了METTL3基因敲除和过表达的BHK-21细胞系，首次发现该分子正向调控FMDV的复制。上述实验结果为进一步开展METTL3在宿主细胞中调控FMDV复制的机制研究奠定了可靠的数据基础。