文献类型: 中文期刊
作者: 陈金霞 1 ; 张宽 1 ; 张玉娇 1 ; 杜楠楠 1 ; 郑海红 1 ; 李丽薇 1 ; 周艳君 1 ; 虞凌雪 1 ; 童武 1 ; 郑浩 1 ; 童光志 1 ; 高飞 1 ;
作者机构: 1.中国农业科学院上海兽医研究所;扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;3’非翻译区;转录调控序列;外源基因表达
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2023 年 31 卷 003 期
页码: 12-19
收录情况: 北大核心
摘要: 利用反向遗传操作技术,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)也可以被用作外源基因表达的活载体.前期研究将猪瘟病毒E2蛋白的编码基因插入了高致病性PRRSV弱毒疫苗株HuN4-F112的非结构蛋白和结构蛋白编码间区,所拯救的重组病毒rPRRSV-E2能够在体外和体内高效表达E2蛋白.能够为猪瘟和HP-PRRS的感染提供100%的免疫保护.本研究利用rPRRSV-E2的全长感染性克隆平台,在PRRSV基因组ORF7和3'非翻译区之间插入了转录调控序列6(TRS6)和绿色荧光蛋白的编码基因,构建并拯救了重组病毒rPRRSV-E2-EGFP,该病毒感染MARC-145细胞后,可以同时表达猪瘟E2蛋白和EGFP.外源序列在载体中能够保持遗传稳定.本研究为开发PRRSV作为病毒活载体疫苗提供了一个新的外源基因插入位点和构建策略,对今后多价疫苗的研发有重要意义.
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