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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株作为外源基因表达活病毒载体的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 陈金霞 1 ; 张宽 1 ; 张玉娇 1 ; 杜楠楠 1 ; 郑海红 1 ; 李丽薇 1 ; 周艳君 1 ; 虞凌雪 1 ; 童武 1 ; 郑浩 1 ; 童光志 1 ; 高飞 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院上海兽医研究所;扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;3’非翻译区;转录调控序列;外源基因表达

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2023 年 31 卷 003 期

页码: 12-19

收录情况: 北大核心

摘要: 利用反向遗传操作技术,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)也可以被用作外源基因表达的活载体.前期研究将猪瘟病毒E2蛋白的编码基因插入了高致病性PRRSV弱毒疫苗株HuN4-F112的非结构蛋白和结构蛋白编码间区,所拯救的重组病毒rPRRSV-E2能够在体外和体内高效表达E2蛋白.能够为猪瘟和HP-PRRS的感染提供100%的免疫保护.本研究利用rPRRSV-E2的全长感染性克隆平台,在PRRSV基因组ORF7和3'非翻译区之间插入了转录调控序列6(TRS6)和绿色荧光蛋白的编码基因,构建并拯救了重组病毒rPRRSV-E2-EGFP,该病毒感染MARC-145细胞后,可以同时表达猪瘟E2蛋白和EGFP.外源序列在载体中能够保持遗传稳定.本研究为开发PRRSV作为病毒活载体疫苗提供了一个新的外源基因插入位点和构建策略,对今后多价疫苗的研发有重要意义.

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