文献类型： 中文期刊
作者：
陈英
1
;
乔军
2
;
孟庆玲
2
;
刘田莉
2
;
钟文强
2
;
贡莎莎
2
;
王熙凤
2
;
黄运福
2
;
才学鹏
3
;
作者机构： 1.石河子大学动物疾病防控兵团重点实验室;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室
2.;石河子大学动物疾病防控兵团重点实验室;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室
3.;石河子大学动物疾病防控兵团重点实验室;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室;
关键词： 细粒棘球蚴;Eg TPx抗原基因;克隆;表达;反应原性
期刊名称： 贵州农业科学
ISSN： 1001-3601
年卷期： 2018 年 01 期
页码： 68-73
摘要： 为明确绵羊细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)硫氧还蛋白过氧化物酶(Thioredoxin peroxidase,TP_x)蛋白的反应原性,并进一步利用Eg TP_x重组蛋白作为Eg感染诊断中的候选标识分子奠定基础,根据GenBank中Eg TP_x基因的cDNA序列设计特异性引物,以Eg头节为总RNA模板,进行RTPCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体,经测序验证后亚克隆至表达载体pET-32a中,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达的重组蛋白进行纯化及反应原性分析。结果表明:Eg TP_x cDNA全长为582个核苷酸,编码193个氨基酸。该多肽含有1个N端糖基化位点,1个N端酰基化位点,5个酪蛋白激酶Ⅱ(CKⅡ)磷酸化位点,4个蛋白激酶C(PKC)磷酸化位点;抗原表位区集中在58~94位和160~188位。重组菌可表达分子量为37ku的重组蛋白,重组蛋白Eg TP_x抗原能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。
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