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甜菜夜蛾SeABCB3基因的克隆、表达及与Bt Cry1Ab35的结合特性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 郭晓昌 1 ; 赵丹 1 ; 王倩 1 ; 王冠迪 1 ; 温晶鑫 1 ; 吴涵 2 ; 郭巍 1 ;

作者机构: 1.河北农业大学植物保护学院

2.中国农业科学院研究生院

关键词: 甜菜夜蛾;ABC转运蛋白;克隆与表达;表达分析

期刊名称: 中国生物防治学报

ISSN: 2095-039X

年卷期: 2024 年 002 期

页码: 327-336

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了深入解析Cry1Ab蛋白对主要农业害虫甜菜夜蛾的作用机制,本研究开展了甜菜夜蛾ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transporter)与Bt Cry1Ab35蛋白的结合特性研究。首先,本研究克隆获得了甜菜夜蛾ABC转运蛋白Se ABCB3全长基因序列(GenBank登录号为OP948097),开放阅读框为3915bp,编码1304个氨基酸,预测蛋白分子量为142.66kDa。进一步克隆了编码膜外区域SeABCB3-OM,并构建了原核表达载体pET30a-SeABCB3-OM,成功表达38kDa的重组蛋白;并且Ligandblot及ELISA分析结果显示重组蛋白Se ABCB3-OM能与BtCry1Ab35活化蛋白特异性结合,推测其为BtCry1Ab35蛋白的受体蛋白。实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)结果表明,SeABCB3在甜菜夜蛾的各龄期和不同组织中均有表达,其中在卵期和马氏管的表达量最高;本研究克隆获得甜菜夜蛾SeABCB3基因,分析了各龄期及组织结构的表达情况,明确了Se ABCB3蛋白与BtCry1Ab35蛋白的结合特性,为进一步深入研究Bt Cry蛋白对甜菜夜蛾的杀虫作用机制提供了基础。

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