文献类型： 中文期刊

作者： 牟慧 ¹ ; 高美须 ¹ ; 李淑荣 ¹ ; 王志东 ¹ ; 潘家荣 ¹ ; 赵杰 ¹ ; 支玉香 ¹ ; 李树锦 ¹ ; 赵鑫 ¹ ;

作者机构： 1.农业部农产品加工重点实验室/中国农业科学院农产品加工研究所;北京农业职业学院;中国计量学院生命科学院;北京协和医院变态反应科

关键词： Pen a1;抗原表位;突变多肽;关键氨基酸

期刊名称： 分析化学

ISSN： 0253-3820

年卷期： 2014 年 11 期

页码： 1604-1610

收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立了一种利用表位抗体筛选虾过敏原Pen a1抗原表位中关键氨基酸的方法。利用生物信息学软件MEGA5计算Pen a1中表位的氨基酸组成和出现频率,并采用DNAMAN软件对SDAP数据库中致敏食物原肌球蛋白的氨基酸保守性分析,综合两种方法筛选出各表位可能的关键氨基酸,Epitope 1:K,E,N;Epitope2:K,L,E;Epitope 3:E,R,D,L,Q;Epitope 5:K,L,Q。用丙氨酸取代并合成突变多肽。利用表位抗体,通过竞争性免疫斑点法及间接ELISA方法检测突变多肽的抗体结合能力,筛选出各表位的关键氨基酸。分别为:Epitope1:谷氨酰胺;Epitope2:亮氨酸和谷氨酸;Epitope3:亮氨酸和天冬氨酸;Epitope5:亮氨酸。实验结果证明了此种筛选关键氨基酸的方法的可行性,为Pen a1致敏机理的研究及利用基因修饰脱敏提供了一定的理论依据。