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植物抗体基因工程：II．马铃薯Y病毒中和抗体cDNA基因文库的构建及含抗体轻链和重链基因阳性克隆的筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 刘德虎 1 ; 郭军 2 ; 陈三风 2 ; 梁华 2 ; 王海扬 2 ;

作者机构： 1.中国农业科学院生物技术研究中心分子生物学室

2.中国农业科学院生物技术研究中心分子生物学室，北京农业大学生物学院微生物学系

关键词： 马铃薯Y病毒，单克隆抗体，K轻链，γ＿1重链，基因克隆

期刊名称： 高技术通讯

ISSN： 10020470

年卷期： 1995 年 03 期

页码：

收录情况： EI

摘要： 从大量繁殖的Ｄ７３杂交瘤细胞中提取制备其基因组ｍＲＮＡ，并以此为模板，经反转录途径获得基因组ｃＤＮＡ，随后将其插入到λｇｔ１１中，构建了马铃薯Ｙ病毒小鼠单克隆抗体ｃＤＮＡ基因文库。经免疫原位杂交，从该基因文库中筛选出３０个含抗体轻链基因和１０个含抗体重链基因的阳性克隆，进一步将其插入到ｎＧＥＭ－７Ｚ（＋）质粒中，经酶切分析和电泳检测，证实在获得的轻链和重链阳性克隆中各有一个质粒（Ｋ６和Ｇ９）具有较长的外源ＤＮＡ插入（分别为１Ｋｂ和１．６Ｋｂ），它们可能编码完整的抗体轻链和重链蛋白。

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