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猫杯状病毒蚀斑纯化方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 赵静杰 1 ; 梁琳 1 ; 刘子宁 1 ; 肖发沂 2 ; 贾亚雄 1 ; 梁瑞英 1 ; 崔尚金 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

2.山东畜牧兽医职业学院

关键词: 猫杯状病毒;蚀斑纯化;病毒分离;病毒纯化

期刊名称: 中国兽医杂志

ISSN: 0529-6005

年卷期: 2021 年 010 期

页码: 15-19

收录情况: 北大核心

摘要: 猫杯状病毒(FCV)是引起猫科动物呼吸道疾病的重要病原之一,常用患病猫的口鼻眼拭子进行病原学诊断或病毒分离,病原微生物的混合感染给病毒的分离纯化带来困难。为了快速获得纯化的FCV,本试验将临床检测FCV和猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)混合病料处理后进行蚀斑纯化及条件优化。结果显示:将细胞数约为7×105个/mL的F81细胞以每孔2 mL铺入6孔板中,待病毒吸附90 min后覆盖浓度为2%的第1层低熔点琼脂糖溶液,于37℃、5%CO2培养箱倒置培养48 h,然后加入含0.01%中性红的第2层低熔点琼脂糖溶液,于37℃、5%CO2培养箱培养,此条件所形成蚀斑的数量及大小均适合挑取。通过3次克隆纯化,挑取蚀斑进行了RT-PCR检测,成功从FCV和FHV-1的混合病毒中分离纯化到1株FCV。本试验首次建立的FCV蚀斑克隆方法,有助于FCV以及其他病毒的分离纯化,并为病毒的生物学特性试验提供科学依据。

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