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干种子高质量总RNA的快速提取方法

文献类型： 中文期刊

作者： 胡群文 1 ; 陈晓玲 1 ; 张志娥 1 ; 辛霞 1 ; 卢新雄 1 ; 刘旭 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院作物科学研究所/农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室

关键词： 种子;总RNA提取;SDS;异硫氰酸胍;RNA反转录;RT-PCR

期刊名称： 植物遗传资源学报

ISSN： 1672-1810

年卷期： 2010 年 11 卷 03 期

页码： 360-363

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 高效快速提取高质量的种子RNA是种子分子生物学研究的基础。现有的提取方法难以高效快速地从种子中得到高质量的总RNA。本试验有机地将改进SDS法和异硫氰酸胍法相结合,采用改进的酸性SDS提取液、不溶性PVPP(聚乙烯聚吡咯烷酮)阻止酚类氧化、KAc去除多糖、异丙醇沉淀RNA,可以高效地从0.01～0.1g水稻、大豆、蚕豆、芸豆、花生等干种子中提取到高质量总RNA。此法提取的总RNA,能够满足分子生物学研究的要求,可以进行反转录和RT-PCR反应,用于基因表达研究,并为从具相似成分的其他物种干种子提取总RNA提供参考方法。

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