文献类型： 中文期刊
作者： 崔伟业 1 ; 周雷 2 ; 单柳颖 2 ; 张君 2 ; 戴小枫 2 ; 郭维 3 ;
作者机构： 1.中国农业科学院农产品加工研究所
2.;中国农业科学院农产品加工研究所
3.;中国农业科学院农产品加工研究所;
关键词： 大丽轮枝菌;致病力;T-DNA;hiTAIL-PCR;侧翼序列分析
期刊名称： 棉花学报
ISSN： 1002-7807
年卷期： 2018 年 01 期
页码： 29-37
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 【目的】从大丽轮枝菌T-DNA突变体库中筛选鉴定致病缺陷型突变体并分析致病相关基因。【方法】将落叶型大丽轮枝菌菌株Vd991的294个T-DNA插入突变体在寄主棉花上进行致病力测定。利用Southern杂交和hiTAIL-PCR(High-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR)技术分别对筛选获得的9个致病力显著降低的突变体进行拷贝数和侧翼序列分析。【结果】与接种野生型Vd991的棉花相比,接种突变体的棉花的病情指数极显著降低。Southern杂交表明其中1个突变体中T-DNA为双拷贝插入,其余8个突变体均为单拷贝插入。生物学特性分析发现T-DNA的插入导致这些突变体在生长速率和产孢量等方面与野生型Vd991相比均有不同程度的降低。Blast比对分析明确了这些突变体中T-DNA的插入位置和在基因组上的分布,并从野生型菌株Vd991中成功克隆得到了这些可能影响大丽轮枝菌致病力的相关基因。【结论】筛选和鉴定T-DNA插入突变是在全基因组范围内快速获得致病相关基因信息的1种有效方法,极大的促进了大丽轮枝菌的致病分子机制等研究,为进一步培育抗病棉花品种奠定了基础。
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