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工业大麻腺毛发育基因CsMIXTA启动子克隆及功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 周智满 1 ; 张小雨 1 ; 高峰 2 ; 戴志刚 1 ; 许英 1 ; 程超华 1 ; 杨泽茂 1 ; 粟建光 1 ; 唐蜻 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院麻类研究所/种质资源研究室

2.云南省工业大麻产业研究院

关键词: 工业大麻;CsMIXTA启动子;瞬时表达;GA3、ABA处理

期刊名称: 作物学报

ISSN: 0496-3490

年卷期: 2024 年 50 卷 011 期

页码: 2754-2763

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: CsMIXTA在调控大麻雌性花器官中腺毛的发生和发育中发挥重要作用。为了研究CsMIXTA基因的表达调控,对CsMIXTA基因上游2199 bp启动子序列进行了克隆。通过PlantCARE预测发现,该启动子序列具有多个胁迫响应元件与光响应元件。根据预测的响应元件分布情况,扩增获得5个5′端缺失的启动子片段。用克隆的启动子全长和缺失片段分别构建融合GUS基因的表达载体,并将其瞬时转化到烟草叶片和工业大麻糖叶中。通过GUS染色观察发现,CsMIXTA启动子的核心区域位于–393~–99bp之间,包含赤霉素响应元件TATC-box和转录起始元件TATA-box。通过LUC荧光素酶表达发现, CsMIXTA启动子的核心区域具有转录活性。研究还发现, CsMIXTA基因在工业大麻糖叶的腺毛中特异性表达。对启动子进行胁迫响应分析的结果显示,低温、脱落酸(ABA)和赤霉素(GA3)都能增强该启动子的活性。这些结果为CsMIXTA基因调控机制研究奠定了重要基础。

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