文献类型： 中文期刊

作者： 王磊 ¹ ; 曹平华 ¹ ; 蔡蓓 ¹ ; 高印 ¹ ; 高康 ¹ ; 杨雨鑫 ¹ ; 杨明明 ¹ ; 袁超 ² ; 陈玉林 ¹ ;

作者机构： 1.西北农林科技大学动物科技学院

2.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

关键词： 转基因;内切葡聚糖酶基因;罗伊乳酸杆菌;饲喂效果;肉鸡

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2015 年 46 卷 05 期

页码： 774-783

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在构建可胞外分泌内切葡聚糖酶,且具有降解β-葡聚糖能力的转内切葡聚糖酶基因罗伊乳酸杆菌,并对其进行肉鸡饲喂效果验证,为后续转基因乳酸杆菌在动物生产中的应用奠定基础。采用PCR和酶切连接方法构建pLEM4157(cel)载体,转化Lactobacillus.reuteri XC1感受态细胞,进行聚丙烯胺凝胶电泳表达谱分析和内切葡聚糖酶活性测定,同时测定其肉鸡饲喂效果。结果表明,克隆的内切葡聚糖酶基因大小为1 500bp,经测序比对,与已报道基因序列相似性为99%,氨基酸序列相似性为100%;Native-PAGE和SDS-PAGE分析结果表明,内切葡聚糖酶基因celW成熟肽在罗伊乳酸杆菌的蛋白分子量均为52ku左右,与理论计算值相符;L.reuteri pLEM4157(cel)培养上清和胞内上清内切葡聚糖酶活性分别为(0.96±0.08)和(0.37±0.09)U·mL-1;L.reuteri pLEM4157(cel)对肉仔鸡生长性能无显著影响,但可显著降低21日龄肉仔鸡十二指肠、空肠pH,促进21日龄肉仔鸡肾、法氏囊、胸腺和胰腺的生长发育,增加42日龄肉仔鸡的胸腺和胰腺指数,提高肉仔鸡21日龄血清白球比、钙、磷含量和42日龄血清葡萄糖含量。L.reuteri pLEM4157(cel)成功分泌表达了内切葡聚糖酶,具有降解羧甲基纤维素的能力和一定的肉鸡饲喂效果。