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多房棘球绦虫蛋白Musashi-1的克隆及RNA结合功能初步鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 吴易璇 1 ; 仲顺虎 2 ; 郭小腊 3 ; 陈轶霞 1 ;

作者机构： 1.西北民族大学生命科学与工程学院

2.临夏市动物疫病预防控制中心

3.中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控国家重点实验室

关键词： 多房棘球绦虫;RNA结合蛋白;Musashi-1;生发层

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年 54 卷 010 期

页码： 1377-1384

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 初步探究Musashi-1蛋白在多房棘球蚴中的分布及其与RNA结合的能力。利用RACE技术获得Musashi-1全长，扩增该基因并克隆到载体pET-28a上，表达并纯化Musashi-1重组蛋白用于制备多克隆抗体；免疫荧光观察Musashi-1在多房棘球蚴组织中的分布；双荧光素酶试验检测Musashi-1蛋白与RNA结合能力。结果显示多房棘球绦虫Musashi-1基因有两个转录本，分别为1 017 bp和966 bp。Western-blot结果表明，制备的多克隆抗体能够特异性识别天然多房棘球绦虫Musashi-1蛋白。免疫荧光试验表明Musashi-1蛋白主要分布在多房棘球蚴生发层细胞中。在亚细胞水平上，Musashi-1蛋白主要分布在细胞质中。双荧光素酶试验表明Musashi-1蛋白能够与Musashi家族共识别RNA基序（富含GUA）结合。本研究确定了编码Musashi-1基因的全长，证实Musashi-1蛋白主要分布在多房棘球蚴生发层细胞中，具有RNA结合能力。本研究为进一步探讨多房棘球绦虫Musashi-1蛋白在多房棘球蚴生发层细胞中的功能提供了帮助。

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