文献类型： 中文期刊

作者： 刘庆伟 ¹ ; 邱亚峰 ¹ ; 王晓杜 ¹ ; 郭林 ¹ ; 刘超 ¹ ; 沈阳 ¹ ; 李向东 ¹ ; 单虎 ² ; 马志永 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室

2.青岛农业大学动物科技学院

关键词： 伪狂犬病病毒;抗PRVgC抗体;Westernblotting

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2011 年 38 卷 03 期

页码： 108-112

收录情况： 北大核心

摘要： 用纯化的重组蛋白His-gCN813制备抗PRV-gC抗体,并分析伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gC蛋白在真核细胞的表达情况。本研究以提取的病毒基因组为模板,PCR克隆PRV gC全长基因,构建gC真核表达质粒p3xFLAG-gC,在真核细胞中表达gC基因;纯化蛋白His-gCN813制备的抗体,Western blotting和间接免疫荧光(IFA)检测到p3xFLAG-gC转染真核细胞和PRV感染细胞中的gC蛋白。结果表明本试验成功构建了PRVgC基因真核表达系统,获得了特异性抗PRV gC抗体,重组gC真核表达质粒p3xFLAG-gC转染Vero细胞,表达的重组蛋白gC为72 ku,PRV感染Vero细胞,表达的gC蛋白为55、72和94 ku,主要定位在细胞浆,gC蛋白可以作为PRV感染的指示分子,为下一步研究PRV和宿主相互作用及PRV的复制奠定了基础。