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基于扩增阻滞突变系统-聚合酶链式反应法的A1/A2牛奶鉴别试剂盒的开发及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 张娟 1 ; 于文杰 1 ; 王楠 1 ; 陈爱亮 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所;郸城县市场监督管理局

关键词： A2牛奶;β-酪蛋白;扩增阻滞突变系统聚合酶链式反应反应技术;鉴别;试剂盒

期刊名称： 食品安全质量检测学报

ISSN： 2095-0381

年卷期： 2024 年 15 卷 007 期

页码： 133-140

收录情况： 北大核心

摘要： 目的 基于扩增阻滞突变系统-聚合酶链式反应(amplification refractory mutation system polymerase chain reaction,ARMS-PCR)技术,开发A1A2牛奶鉴别试剂盒,并对市场上A2牛奶产品进行检测应用,实现对A2牛奶的鉴别检测.方法 本研究先利用D-loop基因片段设计了牛内参基因引物探针组(标记FAM荧光).随后,在β-酪蛋白基因突变位点分别设计了 A1基因引物探针组和A2基因引物探针组(均标记VIC荧光).基于ARMS-PCR技术构建了双通道ARMS-PCR反应体系与程序,进而成功开发了 A1A2牛奶实时荧光ARMS-PCR试剂盒.为进一步验证试剂盒性能,将其应用于市场上A2牛奶的检测,并将检测结果与DNA测序法结果对比.结果 本试剂盒特异性强,检测DNA灵敏度为0.1 ng/L;10份市售实际样品的应用检测结果与测序结果一致.结论 本试剂盒特异性好,灵敏度高、准度度高,适用于A2牛奶的真实性鉴别.

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