文献类型： 中文期刊

作者： 栾兆进 ¹ ; 赵勇超 ¹ ; 许娇霞 ¹ ; 刘永斌 ² ; 张家新 ¹ ;

作者机构： 1.内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室

2.内蒙古自治区农牧业科学院

关键词： 附睾上皮细胞;谷胱甘肽过氧化物酶5;睾酮;雄激素受体;共调节因子

期刊名称： 中国农业大学学报

ISSN： 1007-4333

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 94-108

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探究雄激素受体（Androgen receptor, AR）及共调节因子对绵羊附睾上皮细胞（Epididymal epithelial cells, EECs）谷胱甘肽过氧化物酶5（Glutathione peroxidase 5,GPX5）的调节机制，本研究采用CCK-8检测睾酮对EECs增殖的影响；利用qRT-PCR、免疫荧光法和Western Blot法分别检测AR、GPX5、甾体激素受体共激活子1（Steroid receptor coactivator 1,SRC-1）、CREB结合蛋白（cAMP-response element-binding protein, CBP）、p300和核受体共抑制因子2（Nuclear receptor corepressor 2,NCOR2）的mRNA水平和蛋白表达情况，采用双荧光素酶报告基因测定干扰SRC-1或p300后EECs的荧光素酶活性。结果表明：1)与对照组相比，100 nmol/L睾酮组细胞中的GPX5 mRNA和蛋白表达量极显著升高（P＜0.01）,1 000 nmol/L睾酮组细胞中的GPX5 mRNA和蛋白表达量差异不显著（P＞0.05）,但分别极显著（P＜0.01）和显著（P＜0.05）低于100 nmol/L睾酮组；100 nmol/L睾酮组细胞中的AR mRNA和蛋白表达量分别呈极显著（P＜0.01）和显著（P＜0.05）高于对照组，然而1 000 nmol/L睾酮组细胞中的AR mRNA和蛋白的表达量显著低于对照组（P＜0.05）;1 000 nmol/L睾酮组细胞中的CBP、p300、SRC-1蛋白表达极显著高于对照组（P＜0.01）,特别是核内的表达量明显增高。2)与对照组相比，siRNA-AR组细胞中的GPX5 mRNA和蛋白的表达量差异不显著（P＞0.05）,而SRC-1和p300蛋白表达量极显著升高（P＜0.01）。pcDNA3.1-AR组GPX5 mRNA和蛋白表达量较对照组呈极显著（P＜0.01）和显著（P＜0.05）升高。3)siRNA-SRC-1和siRNA-p300组细胞中的GPX5 mRNA和蛋白表达量较对照组均显著降低（P＜0.05）,而AR的蛋白表达量与对照组差异不显著（P＞0.05）,AR的转录活性显著降低（P＜0.05）。综上，睾酮对绵羊EECs GPX5、AR及其共调节因子的表达具有浓度依赖性的调节效应，睾酮通过AR及其共调节因子SRC-1和p300/CBP的协同调节GPX5表达。本研究为探究GPX5在绵羊附睾中的调节机制提供理论依据。