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犬细小病毒层析纯化方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 代昕宇 1 ; 胡博 1 ; 邓效禹 1 ; 张成琪 1 ; 李昀真 1 ; 李甜甜 1 ; 孙亚杰 1 ; 许丽文 1 ; 白雪 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院特产研究所

关键词： 犬细小病毒;纯化;离子交换;分子筛

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2024 年 56 卷 004 期

页码： 49-53

收录情况： 北大核心

摘要： 病毒纯度是抗体制备和疫苗免疫效果提升的关键,本文利用Purose shell V15 离子交换层析和Sepharose 4FF分子筛层析分别建立了犬细小病毒(CPV)的纯化方法.将CPV经过离心澄清和膜包浓缩后,用AKTA蛋白纯化仪结合Purose shell V15 和Sepharose 4FF分别进行纯化,最后使用超滤管浓缩,通过病毒含量测定、总蛋白回收率测定、SDS-PAGE、Western blot和电镜观察分析病毒的纯化效果.结果:2 种方法纯化后病毒形态典型,病毒颗粒大小约20 nm,总蛋白去除率97%以上,回收率71%以上;Purose shell V15 纯化后的病毒经SDS-PAGE和Western blot分析显示无细胞成分的杂带,而Sepharose 4FF纯化后的病毒有少量的牛血清白蛋白条带.本试验结果表明这 2 种方法均可用于CPV的纯化,Purose shell V15 纯化后的病毒纯度更高.

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