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东方百合高效转基因体系构建及EPSP基因的导入

文献类型： 中文期刊

作者： 张洁 1 ; 郭文杰 1 ; 蔡宣梅 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院生物技术研究所

关键词： 百合;EPSP基因;遗传转化;转基因

期刊名称： 北方园艺

ISSN： 1001-0009

年卷期： 2023 年 004 期

页码： 46-53

收录情况： 北大核心

摘要： 以东方百合‘西伯利亚’无菌鳞茎超薄切片（0.5～1.0 mm）为试材，通过PIC和2,4-D不同浓度筛选愈伤诱导培养条件，采用超薄鳞片直接分化及愈伤分化2种转化方式，测试对Cef、Kan及Hgy的耐受性，分析不同干燥预处理以及MES、AS对转化效果的影响，并通过EPSP基因的导入，验证基因转化阳性率及转化效果，以期优化百合遗传转化的技术参数，建立高效遗传转化体系并进行EPSP基因的导入。结果表明：PIC对百合愈伤诱导有良好效果，MS+1 mg·L-1 PIC+0.3 mg·L-1 NAA为最佳愈伤诱导培养基；抗生素敏感性测试发现，培养基添加75 mg·L-1 Kan或20 mg·L-1 Hyg结合250 mg·L-1 Cef适宜抗性筛选；超薄鳞片及愈伤在60 min和30 min的干燥预培养下，阳性率均显著提高；MS+10 mmol·L-1 MES+200μmol·L-1 AS为重悬液处理，超薄鳞片获得48.3%的高效转化率，优于愈伤转化；同时，将EPSP基因转化百合，分子检测表示已获得转基因阳性株。该研究建立以超薄鳞片和愈伤为受体的2套高效遗传转化体系，并成功导入EPSP基因，获得800 mg·L-1的草甘膦抗性，为转基因技术在后续的生产应用奠定技术基础。

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