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非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白的原核表达及其免疫特性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 谢振华 1 ; 刘英楠 1 ; 张萌 1 ; 敖清莹 1 ; 吕璐 1 ; 于婉琪 1 ; 扈荣良 2 ; 邬静 3 ; 陈鸿军 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海兽医研究所

2.军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

3.湖南农业大学

关键词： 非洲猪瘟病毒;C-type lectin蛋白;抗体;免疫特性

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 001 期

页码： 37-44

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了制备非洲猪瘟病毒（ASFV）SY18毒株的C-type lectin蛋白多抗,以基因序列优化的真核质粒为模板,扩增EP153R基因,构建原核表达重组质粒pET-32a-EP153R。将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态中,利用IPTG诱导宿主菌表达后,纯化C-type lectin重组蛋白。用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备C-type lectin蛋白多抗,利用Western-blot和间接免疫荧光技术鉴定该抗体的反应性和特异性。结果表明,原核表达重组蛋白C-type lectin经IPTG诱导表达成功,大小约为38 ku,其主要以包涵体形式表达,且能与His标签单抗发生反应,C-type lectin蛋白多抗可特异性识别非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白。本研究为非洲猪瘟血清学检测方法的建立及C-type lectin蛋白生物学功能的探究奠定了基础。

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