您好,欢迎访问中国农业科学院 机构知识库!

猪冠状病毒四重荧光定量PCR检测方法建立

文献类型: 中文期刊

作者: 俞赵荣 1 ; 孙彤 1 ; 金雪明 1 ; 孙竹筠 1 ; 苏苌 1 ; 刘静宜 1 ; 刘英楠 1 ; 陈鸿军 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院上海兽医研究所

关键词: 猪急性腹泻综合征冠状病毒;猪血凝性脑脊髓炎病毒;猪δ-冠状病毒;猪流行性腹泻病毒;荧光定量RT-PCR

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2025 年 33 卷 002 期

页码: 97-105

摘要: 为了准确鉴别猪重要冠状病毒的感染,本研究设计特异性引物和TaqMan探针,建立了针对猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)、猪δ-冠状病毒(PDCoV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的四重荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法,并对其特异性、敏感性及重复性进行评估。结果显示:该方法具有良好的扩增特异性,可精准区分上述四种猪冠状病毒;对SADS-CoV、PDCoV和PHEV的最低检测限为10拷贝/μL,对PEDV为100拷贝/μL,敏感性较常规PCR提高了100倍;组内和组内变异系数均<2%,重复性良好。结果表明,该方法为猪冠状病毒感染的鉴别诊断提供了可靠分子检测工具,具有重要的临床应用价值。

  • 相关文献

[1]基于DPO引物检测猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用. 王以欣,王紫薇,汉武娇,王丽,姜艳平,崔文,周晗,乔薪瑗,唐丽杰,李一经,徐义刚. 2019

[2]猪急性腹泻综合征冠状病毒S蛋白多克隆抗体的制备及在检测该病毒感染中的应用. 刘大凯,韩郁茹,张记宇,张燎原,冯廷帅,杨小曼,曾苗苗,时洪艳,秦毅斌,石达,冯力. 2024

[3]猪急性腹泻综合征冠状病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及其抗体序列的分析. 曹丽艳,孔祥雨,李想通,索学鹏,段月月,袁聪,施磊,张宇,马国祥,郑海学,王琦. 2023

[4]猪急性腹泻综合征冠状病毒膜蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 段月月,孔祥雨,袁聪,索学鹏,王琦,郑海学,曹丽艳. 2022

[5]猪急性腹泻综合征冠状病毒S1蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立. 杨小曼,时洪艳,张燎原,张鑫,张记宇,刘大凯,冯廷帅,曾苗苗,陈建飞,石达,冯力. 2024

[6]猪急性腹泻综合征冠状病毒诱导细胞自噬并增强病毒复制的研究. 曾苗苗,刘大凯,张记宇,张燎原,冯廷帅,杨小曼,时洪艳,张鑫,陈建飞,石达,冯力. 2024

[7]猪急性腹泻综合征冠状病毒核衣壳蛋白新型线性B细胞表位的鉴定. 曹丽艳,孔祥雨,袁聪,段月月,马国祥,施磊,张宇,万颖,李想通,王娅婷,杜煜,郑海学,王琦. 2025

[8]猪急性腹泻综合征冠状病毒RT-CPA-LFS检测方法的建立与初步应用. 胡泽东,张记宇,丛广义,季朝阳,石达,冯力. 2025

[9]应用灭光定量RT-PCR方法检测PRRSV变异株在仔猪体内动态分布. 荣福龙,刘永刚,孙广力,王淑杰,王洪峰,石文达,李丽琴,徐明明,孙刚,田志军,蔡雪辉. 2010

[10]蚯蚓金属硫蛋白定量PCR检测方法及其分子诊断. 陈春,周启星. 2011

[11]盖塔病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立. 朱翔宇,鲁荣光,胡博,蔡熙姮,刘昊,史宁. 2020

[12]麦蚜Cdc42基因的准确组织定位和定量分析方法研究. 陈巨莲,程登发,孙京瑞. 2010

[13]TaqMan荧光定量RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒的研究. 白兴华,原志伟,李军民,王亚文,贺同欣,冯力. 2009

[14]猪IFN-γ mRNA TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立. 韦天超,田志军,周艳君,安同庆,肖燕,彭金美,姜一峰,童光志. 2009

[15]荧光定量RT-PCR法对犬瘟热病毒PS株感染犬血清和粪便中病毒的检测. 许红丽,易立,王建科,杨莘,程世鹏. 2012

[16]用荧光定量RT-PCR法对高致病性PRRSV变异株感染猪体内分布规律的研究. 危艳武,刘长明,张朝霞,黄立平. 2009

[17]猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立. 白兴华,冯力,陈建飞,时洪艳,孙东波,吴波平,高秀春. 2007

[18]欧洲山芥皂苷合成关键酶基因Bv-beta-AS克隆及表达分析. 魏小春,张晓辉,吴青君,王海平,沈镝,邱杨,宋江萍,李锡香. 2012

[19]绵羊SP-A基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 谢秀兰,黎帅,刘溪源,杨慧君,李颖康. 2016

[20]猪IFN-γmRNATaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立. 韦天超,田志军,周艳君,安同庆,肖燕,彭金美,姜一峰,童光志. 2009

作者其他论文 更多>>