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犬种布鲁氏菌标准阳性血清的研制与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 吕浪 1 ; 冯宇 1 ; 杨柏琼 1 ; 杜鹃 2 ; 蒋玉军 3 ; 乌日恒 3 ; 王拥军 4 ; 蒋卉 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

2.北京市动物疫病预防控制中心

3.内蒙古阿拉善右旗动物疫病预防控制中心

4.内蒙古阿拉善右旗阿拉腾朝格苏木综合行政执法局

关键词: 犬种布鲁氏菌;阳性血清;效价标定;血清凝集试验;间接ELISA

期刊名称: 微生物学通报

ISSN: 0253-2654

年卷期: 2025 年 52 卷 002 期

页码: 601-612

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【背景】犬种布鲁氏菌(Brucella canis)是布鲁氏菌6个经典种之一,是严重危害犬只健康的人畜共患病原。【目的】制备犬种布鲁氏菌阳性血清,为犬布病诊断试剂的开发与应用提供标准物质。【方法】用犬种布鲁氏菌灭活菌液(约1.5×1010 CFU/mL)多次免疫实验用比格犬,制备获得犬种布鲁氏菌病阳性血清,采用试管凝集试验方法,以欧盟犬种布鲁氏菌标准阳性血清溯源并标定血清效价。再以本研究制备的标准阳性血清为标准物质,质控本实验室研制的犬种布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原和犬种布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒的检测灵敏度,并用上述2种方法同时检测北京地区宠物犬血清中犬种布鲁氏菌抗体,比较各方法与补体结合试验结果的符合率。【结果】经试管凝集试验测定,制备获得的犬种布鲁氏菌阳性血清效价为2 400 IU/mL,采用犬阴性血清将阳性血清效价稀释至1 000 IU/mL,分装冻干,即为本研究制备的犬种布鲁氏菌标准阳性血清。将该标准阳性血清作为质控品,检测本实验室研制的犬种布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原和犬种布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒的检测灵敏度均为20 IU/mL。用犬种布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原与犬种布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒对北京地区宠物犬血清临床样品进行检测,与金标准的补体结合试验进行符合率比对,虎红平板凝集试验和补体结合试验的阳性率均为6.25%,间接ELISA抗体检测试剂盒阳性率为5.97%,虎红平板凝集试验、间接ELISA抗体检测试剂盒与补体结合试验的符合率分别为94.31%和94.60%。【结论】本研究制备的犬种布鲁氏菌标准阳性血清为犬种布鲁氏菌诊断试剂的研发提供了必要的质控样品。

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