文献类型： 中文期刊

作者： 周龙玉 ¹ ; 祝瑶 ² ; 林龙华 ² ; 柴霁芸 ² ; 马彩萍 ¹ ; 侯杰 ² ; 张万江 ² ;

作者机构： 1.新疆农业大学动物医学学院

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室/动物细菌病创新团队

关键词： 猪肺炎支原体;分离与鉴定;全基因组测序;毒力基因

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2024 年 46 卷 006 期

页码： 630-635

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了分离与鉴定引起的猪群疑似支原体性肺炎的病原体，本实验收集了20份病死猪肺脏病变组织，采用猪肺炎支原体（Mhp）和猪鼻支原体（Mhr）特异性引物进行PCR鉴定、分析培养特性、颜色变化单位（CCU）测定、传代培养后扩增16S r RNA基因并测序分析等，并进一步采用BLAST分析分离菌16S rRNA基因序列的同源性，采用邻接法构建16S r RNA基因的系统进化树，对该分离株MLST分型、全基因组测序和毒力基因预测。结果显示，20份临床样品仅3份样品为Mhp单阳性，接种KM₂液体培养基后仅1份生长良好，颜色规律性变黄；接种KM₂固体培养基培养7 d后呈现特异性“煎蛋样”的菌落形态；瑞氏姬姆萨染色结果可见环状、点状、丝状、两级状等形状且大小不等的菌体形态，传12代后经特异性PCR检测结果为Mhp单阳性，表明该分离株可以稳定传代，且无Mhr污染；该分离株在KM₂培养基上为1×10～7CCU/mL;16S rRNA基因序列比对结果显示该分离株与GenBank中登录的Mhp菌株ES-2（CP038641.1）同源性达100%。以上结果确定本研究分离出一株Mhp，并将其命名为Mhp-1。16S rRNA基因系统发育树分析结果显示，分离株Mhp-1与国外猪源Mhp分离株F7.2（KY264125.1）处于同一分支，亲缘关系最近；MLST分型结果显示Mhp-1分离株属于ST184型；全基因组测序获得序列大小为0.91 Mb，与已报道的Mhp基因组大小基本一致；毒力基因预测结果显示其存在EF-Tu、Lttp、P216、P102、P46、P97、PDH-B、Capsule、HlyA等毒力因子编码基因。本研究进一步丰富了Mhp的研究数据，为规模化猪场猪支原体性肺炎的防控提供参考数据。