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中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白基因克隆、组织表达分析及原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 胡颖颖 1 ; 徐书法 2 ; 李薇 2 ; Abebe Jenberie WUBIE 2 ; 国占宝 2 ; 周婷 2 ;

作者机构: 1.中国农业科学院蜜蜂研究所

2.中国农业科学院蜜蜂研究所,农业部授粉昆虫生物学重点实验室

关键词: 中华蜜蜂;感觉神经元膜蛋白;基因克隆;组织表达模式;原核表达

期刊名称: 昆虫学报

ISSN: 0454-6296

年卷期: 2013 年 56 卷 01 期

页码: 11-19

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为明确中华蜜蜂Apis cerana cerana嗅觉形成中重要功能因子的信号转导通路,本研究利用RT-PCR方法,克隆了中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白(sensory neuron membrane protein,SNMP)基因编码区,GenBank登录号为KC012595,命名为AccSNMP1。序列分析表明,该编码区开放阅读框长1563bp,编码520个氨基酸,推测的编码蛋白的相对分子量和等电点分别为58.02kD和5.83。同源性比较发现,中华蜜蜂AccSNMP1与其他昆虫感觉神经元膜蛋白基因同源性差异很大,在氨基酸水平上与西方蜜蜂Apis mellifera SNMP基因一致性达99.2%,与熊蜂Bombus impatiens SNMP基因一致性达90.9%,而与赤拟谷盗Tribolium castaneum SNMP基因一致性仅为22.7%。系统发育树显示中华蜜蜂与西方蜜蜂遗传距离最近。实时荧光定量PCR结果分析表明,AccSNMP1在触角中表达量最高,在足中表达量较高,与胸、腹、头(去除触角和喙)、喙中表达量相比差异显著(P<0.05)。构建原核表达载体pEASY-E1-AccSNMP1,经IPTG诱导,中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中高效表达。结果为进一步研究AccSNMP1在中华蜜蜂体内的作用机理奠定了基础。

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