文献类型： 中文期刊
作者： 曲潇玲 1 ; 宋丽云 1 ; 张道顺 2 ; 丁程瀛 1 ; 沈广材 3 ; 张友臣 4 ; 张晓亮 4 ; 焦裕冰 1 ; 李莹 1 ; 杨金广 1 ; 申莉莉 1 ;
作者机构： 1.中国农业科学院烟草研究所
2.长江大学
3.云南省烟草有限公司
4.湖北省烟草公司十堰市公司
关键词： NbNAC062;马铃薯Y病毒;敲除;过表达;HACC-NbNAC062纳米药物
期刊名称： 中国烟草科学
ISSN： 1007-5119
年卷期： 2023 年 44 卷 002 期
页码： 35-42
收录情况： CSCD
摘要： 前期研究表明NbNAC062能够抑制PVY早期侵染,本研究通过构建NbNAC062敲除突变体和过表达植株进一步明确 NbNAC062 的抗病毒功能,并利用异硫氰酸荧光素(fluorescein-5-isothiocyanate,FITC)标记的壳聚糖季铵盐(chitosan quaternary ammonium salt,HACC)包被NbNAC062 质粒,制备HACC-NbNAC062 纳米药物.激光共聚焦显微镜对纳米药物进行示踪;透射电镜和激光粒子分析仪对其表征进行分析.通过GFP荧光差异、qRT-PCR和蛋白免疫印迹检测病毒含量来探明纳米药物对PVY侵染的影响.结果显示,敲除组病毒GFP荧光增强,而过表达组病毒GFP荧光减弱,PVY CP含量与上述结果一致.纳米药物粒径集中分布在18~32 nm之间;Zeta电位为+41.8 mV.浸润纳米药物HACC-NbNAC062后48 h,在细胞内观察到FITC-HACC(绿色荧光)与RFP-NbNAC062(红色荧光);接种PVY-GFP后 5、7、9 d,NbNAC062-HACC施药组的PVY CP mRNA水平较对照组分别下调 17.41%、47.81%、13.03%;第 7 天施药组PVY CP蛋白水平明显低于对照组,病毒荧光强度显著暗于对照组.上述研究结果说明HACC-NbNAC062 纳米药物成功递送了NbNAC062,并发挥了其对PVY初期侵染的抑制作用.
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