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通过定向进化技术提高角蛋白酶的热稳定性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 傅岩 1 ; 张铁鹰 1 ; 孙英霞 1 ; 李松育 2 ;

作者机构： 1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

2.山西农业大学动物科技学院

关键词： 角蛋白酶;定向进化;热稳定性

期刊名称： 动物营养学报

ISSN： 2694-6114

年卷期： 2021 年 33 卷 010 期

页码： 5887-5894

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本试验旨在通过定向进化技术提高角蛋白酶的热稳定性,以拓展角蛋白酶在饲料工业的适用性.试验采用易错PCR方法对地衣芽孢杆菌CP-16的角蛋白酶进行定向进化,筛选获得耐温性好的突变体,并对其进行酶学性质研究与结构功能分析.结果 表明,从5000个突变体中获得3株正向角蛋白酶突变体A307V/S346T、R70G、N245K,其角蛋白酶热稳定性得到了提高.酶学性质研究发现,角蛋白酶突变体R70G热稳定性最强,在75℃热处理5 min后残留酶活性达30.65%,而野生型角蛋白酶热处理5 min后残留酶活性仅1.06%.由此可见,本研究成功获得热稳定性较好的角蛋白酶突变体,拓展了角蛋白酶的适用性,为耐热角蛋白酶开发和相关基因信息探索提供了参考.

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