文献类型： 中文期刊

作者： 许雪飞 ¹ ; 杨盼盼 ² ; 张文亮 ³ ; 边光亚 ³ ; 徐雷锋 ² ; 刘会超 ¹ ; 明军 ² ;

作者机构： 1.河南科技学院园艺园林学院

2.中国农业科学院蔬菜花卉研究所蔬菜生物育种全国重点实验室

3.石家庄市农林科学研究院

关键词： 卷丹;百合斑驳病毒;病毒分布;原位杂交;茎尖;根尖;RT-PCR

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2024 年 40 卷 008 期

页码： 212-220

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】百合斑驳病毒(lily mottle virus,LMoV)是危害重要食药用百合卷丹的主要病毒之一，每年给百合种植业造成数十亿的损失。通过原位杂交技术明确LMoV在卷丹顶端分生组织中的分布，为百合脱毒培养提供支撑。【方法】采用种植于贵州省清镇市的栽培卷丹作为试验材料，利用RT-PCR并于NCBI网站下载不同地方LMoV分离物构建进化树鉴定卷丹所携带的病毒种类，据检测结果选取LMoV为对象，基于LMoV基因组序列设计并制备RNA荧光探针，开展卷丹茎尖和根尖石蜡切片组织的RNA原位杂交，观察卷丹茎尖和根尖中LMoV的分布。【结果】RT-PCR检测表明卷丹材料侵染了LMoV，构建进化树发现本实验分离物与吉林和辽宁的LMoV分离物关系最近，原位杂交进而表明卷丹茎尖中LMoV杂交信号主要分布在顶端分生组织下方0.15-0.2 mm的组织中，靠近紧挨分生组织叶原基的初生叶基部有较弱的病毒杂交信号，靠近初生叶的成熟叶顶端中病毒荧光信号强烈，感染LMoV的卷丹分生组织中心纵切面无毒区大小为(0.4-0.6)mm ×(0.15-0.2)mm；在根尖0.25 mm × 0.2 mm分生组织中无杂交信号分布，在皮层细胞中信号最强烈，在根冠和根伸长区信号较弱。【结论】卷丹顶端分生组织及最接近顶端的一个叶原基[大小约(0.4-0.6)mm×0.2 mm]未发现病毒信号，可作为茎尖脱毒的起始材料。根顶端分生组织外侧根冠有较强病毒信号，不适合作为卷丹脱毒培养的外植体。