文献类型： 中文期刊

作者： 李东旭 ¹ ; 孙伟洋 ² ; 赵梦琳 ² ; 孙悦 ² ; 朱梦涵 ² ; 刘夏薇 ² ; 苏日娜 ² ; 武毓姝 ¹ ; 任娟 ² ; 罗敏 ² ; 王铁成 ² ; 冯娜 ² ; 夏咸柱 ² ; 高玉伟 ² ; 闫芳 ¹ ;

作者机构： 1.山西农业大学

2.中国农业科学院长春兽医研究所

关键词： H1N1嵌合疫苗株;HA;嵌合疫苗;反向遗传技术

期刊名称： 中国病原生物学杂志

ISSN： 1673-5234

年卷期： 2023 年 005 期

页码： 497-501,507

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的 应用反向遗传技术构建以B型流感病毒冷适应株为骨架表达季节性流感病毒H1N1 HA蛋白的嵌合疫苗株。方法 将B型流感病毒冷适应株B/Vienna/1/99的HA片段胞外区替换为H1N1（A/Victoria/2570/2019）的HA蛋白，将重组质粒与骨架株的其余7个质粒共转染293T细胞，拯救H1N1嵌合疫苗株。对重组病毒株进行血凝鉴定、RT-PCR鉴定、电镜鉴定、一步生长曲线绘制以及小鼠安全性评价。结果 成功拯救出H1N1嵌合流感病毒株，命名为rA/B-H1-Vic。经测序鉴定其序列与预期一致，并且在电镜下观察到流感病毒粒子的典型特征。H1N1嵌合流感病毒株血凝效价最高达2~5,在MDCK细胞上的病毒滴度为10^4.5 TCID₅₀/mL,在鸡胚中的病毒滴度为10^8.36EID₅₀/mL。分别以10⁶ EID₅₀和10⁵ EID₅₀剂量鼻腔接种小鼠，其体重与对照组相比无明显下降，小鼠存活率100%,攻毒后第3 d仅在小鼠鼻甲骨和肺脏组织检测到低水平的病毒复制。结论 成功拯救出无毒力的H1N1嵌合疫苗株，为流感病毒新型疫苗的研制提供了新的思路。