文献类型： 中文期刊

作者： 武毓姝 ¹ ; 孙伟洋 ² ; 赵梦琳 ² ; 夏叶婷 ² ; 冯越 ¹ ; 罗敏 ² ; 任娟 ² ; 高鸿博 ² ; 王铁成 ² ; 夏咸柱 ² ; 高玉伟 ¹ ; 闫芳 ¹ ;

作者机构： 1.山西农业大学

2.中国农业科学院长春兽医研究所

关键词： 流感病毒;MDCKs细胞;悬浮培养;生物反应器;工艺优化

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2024 年 002 期

页码： 283-292

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了大规模生产重组B型流感疫苗候选株rIBV，本研究探索了rIBV在无血清MDCKs细胞上的最佳培养条件，再扩大到生物反应器中优化工艺参数，经过连续传代15代后测定了MDCKs细胞源毒种rIBV的遗传稳定性和病毒滴度。通过对病毒培养条件进行优化，我们确定了r IBV在MDCKs细胞上增殖的最佳培养条件是TOI为72 h、MOI=0.001、CCI为4.0×10~6细胞、TPCK胰酶浓度为2μg/m L、50%DO和pH=7.2±0.5。rIBV在MDCKs细胞上连续传代15代后仍然具有高度遗传稳定性。相比于鸡胚源rIBV株，适应MDCKs细胞生长15代后rIBV株的EID₅₀由10^6.25/mL提高至10^9.5/mL,TCID₅₀由10^4.5/mL提高至10^8.25/mL。本研究对重组B型流感疫苗候选株r IBV在MDCKs细胞上的培养工艺进行了优化，获得一株具有高感染力和高病毒滴度的MDCKs细胞源疫苗候选株r IBV，为下游流感疫苗生产及纯化工艺奠定了基础。