文献类型： 中文期刊
作者： 许崇波 1 ; 樛跃 2 ; 许崇利 2 ; 高凤山 2 ; 窦永喜 2 ; 才学鹏 2 ;
作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室
2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室;大连大学医学院;吉林化工学院环境与生物工程学院
关键词： 产气荚膜梭菌;α毒素基因;定点突变;表达
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2010 年 08 期
页码： 811-816
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 利用定点突变技术,将A型产气荚膜梭菌α毒素(CPA)第68位组氨酸(CAT)定点突变成甘氨酸(GGT),构建了含CPA突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)。经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pMCPA-H68G含有CPA-His68Gly突变基因,且基因序列和阅读框架正确。重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)表达产物经SDS-PAGE分析,其表达量占菌体总蛋白相对含量的31.65%。应用EXPASY服务器上的SOPMA法对CPA和CPA-His68Gly突变体分子进行二级结构的预测,同时模拟了其三级结构。结果显示,CPA和CPA-His68Gly突变体的二级结构主要是由α螺旋和无规则卷曲组成的,三级结构非常相似。
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