文献类型： 中文期刊

作者： 卢炳州 ¹ ; 茹毅 ² ; 郝荣增 ² ; 李亚军 ² ; 杨洋 ² ; 杨锐 ¹ ; 毛玉涵 ² ; 蒋成辉 ² ; 陶世宇 ¹ ; 郑海学 ² ; 余四九 ¹ ; 崔燕 ¹ ;

作者机构： 1.甘肃农业大学动物医学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室

关键词： 铁蛋白纳米颗粒;口蹄疫病毒（FMDV）;中和表位;T细胞表位;免疫原性

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2024 年 005 期

页码： 1216-1226

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 蛋白纳米颗粒能够在表面展现多拷贝抗原，模拟病毒的结构形态，更有利于免疫细胞摄取和促进抗原递呈，从而增强疫苗保护效力。本研究旨在利用大肠杆菌（Escherichia coli）表达系统制备展示口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus, FMDV）优势中和表位的铁蛋白纳米颗粒，并评估其免疫原性。首先以幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）铁蛋白序列为基础，将FMDV优势中和表位序列插入铁蛋白第33和34位氨基酸之间，同时将耶尔森氏菌属（Yersinia） T细胞表位序列插入铁蛋白氨基酸序列的氨基末端，构建具有铁蛋白序列、B细胞表位（优势中和表位）和T细胞表位的重组表达质粒pET28a-FBT，以仅插入铁蛋白序列的重组质粒pET28a-Fer作为对照。将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞，经诱导表达和分子筛层析纯化获得目的蛋白，利用SDS-PAGE、Western blot、粒径分析和透射电镜进行鉴定，进一步免疫BALB/c小鼠（Mus musculus）评价免疫原性。结果显示，利用大肠杆菌表达系统成功制备的铁蛋白纳米颗粒FBT可与FMDV阳性血清发生特异性反应；FBT免疫14 d即产生血清抗体，并持续升高，在免疫35 d中和抗体效价最高可达1∶128；同时，FBT免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖水平和白介素2 （interleukin 2, IL-2）、IL-4、IL-10、干扰素-γ （interferon-γ, IFN-γ）分泌水平显著高于对照组（P＜0.05）。本研究制备了展示FMDV中和表位且具有良好免疫原性的铁蛋白纳米颗粒，为新型口蹄疫基因工程疫苗的研制提供技术支持。