您好，欢迎访问云南省农业科学院 机构知识库！

非洲菊基因组DNA提取及ISSR-PCR扩增模板浓度优化

文献类型： 中文期刊

作者： 李宗菊 1 ; 熊丽 2 ; 桂敏 2 ; 李金泽 2 ; 刘小莉 1 ; 刘飞虎 1 ;

作者机构： 1.云南大学生物技术系

2.云南省农业科学院园艺研究所

关键词： 非洲菊;DNA提取;模板浓度

期刊名称： 云南植物研究

ISSN： 0253-2700

年卷期： 2004 年 26 卷 04 期

页码： 439-444

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以改良的CTAB法为基础 ,对非洲菊基因组DNA提取进行了下述优化 :在第二次用氯仿 异戊醇抽提时 ,加入“PCN”溶液 (0 0 6 75gPVP ,4 5 μl 10 %CTAB +4%NaCl) ,可明显去除多糖 ;在材料研磨时加入化学物质M (0 10 0 0gNa2 SO3 ,0 0 5 0 0gVC)及N (0 0 2 0 0gVE ,0 10 0 0gNa2 B4O7,0 0 2 0 0gPVP ,2 0 0 μlβ -巯基乙醇 ) ,都可去除酚类物质 ,明显提高DNA及ISSR PCR扩增的质量 ,但N的效果稍优于M ;同时加入M、N及“PCN” ,具有明显的优化效果 ,所提 5个样品DNA ,平均A2 6 0 A2 80、A2 6 0 A2 30分别为 1 81、 2 0 2 ,浓度为 0 6 49μg μl,片段大小约为 4 9kb ,ISSR扩增带多且清晰、明亮、稳定性及多态性高 ,表明DNA纯度很高。对扩增反应的最佳模板浓度进行研究表明 ,所提DNA模板必须稀释 30倍 (浓度为 15～30ng μl时 ) ,才能扩增出清晰的谱带。

  • 相关文献

[1]非洲菊品种间杂交主要观赏性状在F1代的遗传表现. 李绅崇,吴丽芳,李淑斌,蒋亚莲,杨春梅. 2006

[2]农杆菌介导的二氢黄酮醇3’5’羟化酶cDNA对非洲菊的转化及对其花色的影响(英文). 郑丽屏,刘继梅,王玲仙,黄兴奇,钦佩. 2003

[3]非洲菊叶外植体组培中影响褐化因素及机理初探. 夏小环,王静,尹梅,陈志伟,陈善娜. 2006

[4]小细胞团为受体的根癌农杆菌介导的非洲菊基因转化体系. 叶华,陈善娜,陈苇,李劲峰,李根泽,王敬乔. 2006

[5]矮壮素对非洲菊转基因苗生长的促进作用. 王玲仙,谢吉容,孙一丁,丁玉梅,季鹏章,程在全,黄兴奇. 2007

[6]非洲菊单倍体植株的生长特性初报. 单芹丽,阮继伟,吴丽芳,张松,汪国鲜,李绅崇,杨春梅. 2016

[7]利用卡那霉素筛选非洲菊转基因植株的技术研究. 张宝琼,范眸天,屈云慧,于丽霞,李涵. 2009

[8]切花非洲菊多倍体诱变初报. 李涵,鄢波,张婷,蒋亚莲,张颢,于丽霞,李绅崇. 2009

[9]利用基因芯片分析非洲菊花序发育相关基因的表达. 曾黎琼,张伟,段玉云,李援亚,程在全,黄兴奇. 2009

[10]非洲菊杂交F_1代瓶插寿命遗传变异研究. 曹桦,李绅崇. 2008

[11]GPAT基因表达载体的构建及对非洲菊的遗传转化. 尹梅,程在全,夏小环,张伟媚,陈善娜. 2007

[12]一种新的适合于农杆菌介导的非洲菊基因转化受体体系. 叶华,朋金娥,程在全,陈善娜,黄兴奇. 2004

[13]PBI121/GPAT质粒的构建及对非洲菊转化. 尹梅,程在全,夏小环,陈志伟,陈善娜. 2009

[14]非洲菊良种保持及繁育技术. 李绅崇,蒋亚莲,吴丽芳,曹桦. 2008

[15]非洲菊品种间杂交主要观赏性状在F_1代的遗传表现. 李绅崇,李淑斌,蒋亚莲,杨春梅,吴丽芳. 2007

[16]头孢类抗生素对农杆菌介导非洲菊基因转化的影响. 赵凯琴,王玲仙,曾黎琼,程在全,黄兴奇. 2008

[17]花序特征和季节对非洲菊不定芽诱导的影响. 单芹丽,吴丽芳,余蓉培,瞿素萍,杨春梅. 2017

[18]非洲菊新品种‘红袍’. 单芹丽,曹桦,赵培飞,阮继伟,吴丽芳,汪国仙,杨春梅,李绅崇. 2017

[19]非洲菊抗疫病切花新品种‘靓粉’. 李绅崇,李金泽,吴丽芳,蒋亚莲,曹桦,李涵. 2008

[20]施肥过量对无土栽培非洲菊生长和开花的影响. 单芹丽,李绅崇,汪国鲜,吴丽芳,阮继伟,余蓉培,曹桦,杨春梅,蒋海玉. 2018

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：云南省农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台