文献类型： 中文期刊

作者： 鲁芳 ¹ ; 张蓓 ¹ ; 刘永 ¹ ; 宋迎 ¹ ; 郭刚兴 ¹ ; 杨培龙 ¹ ; 姚斌 ¹ ; 郭素娟 ¹ ; 高伟 ¹ ;

作者机构： 1.北京林业大学省部共建森林培育与保护教育部重点实验室;北京林业大学理学院;中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点实验室

关键词： β-折叠桶碱性植酸酶;生物信息学分析;酶学特性

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2018 年 09 期

页码： 1582-1592

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】表达、纯化来源于Bacillus sp.HJB17的双功能域β-折叠桶碱性植酸酶(phy HT),并对该酶进行蛋白序列以及酶学特征分析,为该酶的广泛应用奠定基础。【方法】应用生物信息学技术,对phy HT蛋白序列进行了生物信息学分析。表达、变复性、分离纯化得到具有酶活性的可溶性phy HT蛋白溶液,通过硫酸亚铁-钼蓝法对phy HT的酶学特性进行了研究。【结果】序列分析结果显示,phy HT由633个氨基酸组成,含有2个植酸酶结构域,属于典型的BPP植酸酶,相对分子量(MW)为69321.68 Da,理论等电点为5.37,为亲水性蛋白。二级结构中,phy HT中α-螺旋(helix)、β-片层(sheet)占主要的比例,高级结构以β片层形成的桶状结构为主。酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为35°C,在45°C以下比较稳定。最适的p H为8.0,在p H为6.0–12.0条件之间比较稳定。低浓度的Ca~(2+)以及Mg~(2+)对酶活性有促进作用,Fe~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)、Ni~(2+)等金属离子对酶活性有抑制作用。【结论】本研究成功对phy HT进行了蛋白序列分析以及酶学性质研究,phy HT属于碱性植酸酶,酶活性高、稳定性好,在理论研究和工业生产方面均有很大应用价值。