文献类型： 中文期刊

作者： 王运航 ¹ ; 吕熙 ² ; 段梦迪 ² ; 魏甜 ² ; 李毅 ² ; 张雅雅 ² ; 陈相杨 ² ; 郭慧琛 ² ; 孙世琪 ² ; 白满元 ² ; 敬晓棋 ¹ ;

作者机构： 1.榆林学院生命科学学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 猪圆环病毒2d型;病毒样颗粒;大肠杆菌表达系统;发酵工艺

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年 54 卷 010 期

页码： 1351-1358

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备猪圆环病毒2d型（PCV2d）病毒样颗粒（VLPs）疫苗并对其免疫效果进行评价。本研究采用原核表达系统表达PCV2d Cap蛋白，并对其发酵工艺条件进行了优化，去除His-SUMO标签使其体外自组装形成VLPs，通过SDS-PAGE和Western-blot进行验证，采用透射电镜和纳米粒度仪进行表征，将验证正确的VLPs免疫小鼠，测定其抗体水平和细胞因子水平。结果显示，在0.5 mmol/L IPTG、N源补料速率为12%时，蛋白表达量最高，利用透射电镜、纳米粒度仪进行表征鉴定，发现PCV2d可自组装形成VLPs，粒子直径约为20～25 nm。PCV2d VLPs与ISA 201佐剂混合免疫小鼠，特异性抗体滴度达到1∶512以上，中和抗体滴度达到1∶32以上，IL-4和IFN-γ细胞因子水平均可达到80 pg/m L，且明显高于PBS组。综上所述，本研究利用原核表达系统构建表达并成功获得PCV2d VLPs，且可以诱导机体产生良好的细胞免疫和体液免疫，这为猪圆环病毒2d型疫苗及猪圆环病毒多价疫苗的研制奠定了基础。