文献类型： 中文期刊
作者： 毕振威 1 ; 徐立波 2 ; 夏兴霞 1 ; 梁霆 3 ; 王永山 1 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心
2.山东省招远市农业农村局
3.江苏省农业农村厅
关键词： 犬瘟热病毒;单克隆抗体;流行毒株;疫苗毒株;鉴别检测
期刊名称： 江苏农业科学
ISSN： 1002-1302
年卷期： 2020 年 48 卷 020 期
页码： 178-182
收录情况： 北大核心
摘要： 为了制备鉴别犬瘟热病毒(CDV)流行强毒株和疫苗弱毒株的单克隆抗体,将CDV 851弱毒株浓缩后经蔗糖密度梯度离心纯化,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合,经3~5次克隆,间接ELISA筛选,获得稳定分泌抗CDV的杂交瘤细胞2D12株.该细胞株分泌的单克隆抗体亚类为IgG1κ,与常见犬病毒不发生交叉反应.间接免疫荧光显示,单克隆抗体与CDV 851毒株发生特异性反应,与杆状病毒表达的CDV 851毒株H蛋白发生特异性反应.Western blot检测发现,单克隆抗体与2株CDV强毒株H蛋白不发生反应,而与2株CDV弱毒株H蛋白有特异性反应.双抗体夹心ELISA显示,单克隆抗体能检测CDV疫苗弱毒株而不能检测CDV强毒株.病毒中和试验证实,单克隆抗体对CDV 851弱毒株具有中和能力.制备了区分CDV强毒株和疫苗弱毒的单克隆抗体,为CDV的鉴别诊断技术研究奠定了基础.
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