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猪流行性腹泻病毒E蛋白诱发细胞未折叠反应的分子机制

文献类型： 中文期刊

作者： 邢广旭 1 ; 焦文强 1 ; 王方雨 1 ; 张改平 1 ;

作者机构： 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

关键词： 猪流行性腹泻病毒;E蛋白;信号通路

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2022 年 54 卷 009 期

页码： 60-65

收录情况： 北大核心

摘要： 为阐明猪流行性腹泻病毒(PEDV)E蛋白诱导Vero-E6细胞内质网应激分子机制,采用RT-PCR方法扩增得到E蛋白基因,经XhoI和BamH I酶切后与同样酶切的p-EGFP-N1载体使用T4 DNA连接酶进行连接,成功构建了表达载体,与pCDNA 3.1-GRP78共转染Vero-E6细胞,通过激光共聚焦试验和Westernblot验证E蛋白的细胞定位,并揭示其激活细胞内质网应激的分子机制.结果表明,通过共聚焦荧光显微镜证实E蛋白定位在细胞中,Westernblot方法验证E蛋白可以上调Vero-E6细胞GRP78蛋白表达水平,诱导Vero细胞内质网应激.进一步采用Western blot验证E蛋白通过PERK-eIF2α信号通路激活未折叠蛋白反应.本研究为探究PEDV致病机制提供了新的思路.

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