文献类型： 中文期刊

作者： 温永强 ¹ ; 于瑞明 ² ; 张莉萍 ² ; 张中旺 ² ; 王永录 ² ; 潘丽 ² ; 刘霞 ¹ ; 刘新生 ² ;

作者机构： 1.甘肃农业大学生命科学技术学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所

关键词： HMCES;猪流行性腹泻病毒;病毒复制;Vero细胞

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2022 年 62 卷 008 期

页码： 3152-3165

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]鉴定能够调控猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)复制的关键宿主蛋白.[方法]利用LC-MS/MS技术结合串联质谱标签(tandem mass tag,TMT),分析PEDV感染Vero细胞36 h后和未感染组的蛋白组学差异.鉴定筛选了 114个显著差异表达蛋白,其中宿主胚胎干细胞特异性5-羟甲基胞嘧啶结合蛋白(5-hydroxymethylcytosine binding,ES cell-specific protein,HMCES)显著上调.进一步构建HMCES真核表达质粒,通过蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR检测过表达HMCES对PEDV复制的影响;合成针对HMCES基因的特异性siRNA,利用Western blotting和RT-qPCR检测siRNA对HMCES表达的干扰效果及HMCES被干扰后对PEDV复制的影响.[结果]过表达HMCES能显著促进PEDV在Vero细胞中复制,并且复制水平随着HMCES的剂量递增呈现剂量依赖式增加;siRNA-341下调内源性HMCES表达进而抑制PEDV复制.[结论]HMCES促进PEDV复制,本研究为进一步探究HMCES在抗PEDV免疫应答中的作用及机制提供了参考依据.