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草莓黄单胞菌RPA-LF快速检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 史春佳 1 ; 李刚 1 ; 刘林川 1 ; 秦梦瑶 1 ; 刘丽锋 1 ; 宋艳红 1 ; 赵霞 1 ; 周厚成 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院郑州果树研究所

关键词: 草莓黄单胞菌;RPA-LF检测;田间;早期诊断

期刊名称: 中国果树

ISSN: 1000-8047

年卷期: 2024 年 004 期

页码: 114-121,127

收录情况: 北大核心

摘要: 建立一种适用于田间稳定、快速、准确地检测草莓黄单胞菌的技术方法,有助于该病原菌的早期诊断和有效控制。将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)和胶体金侧流层析试纸条技术(lateral flow strip,LF)相结合。根据草莓黄单胞菌的限制性核酸内切酶亚基S基因序列保守区设计RPA特异引物及探针,通过对反应条件优化及对灵敏性、特异性与疑似样本的分析,成功建立了草莓黄单胞菌RPA-LF检测方法。该方法最佳反应条件为39℃恒温反应10 min,最低检测限为1.0×10~1 copies/μL,能够特异地检测出草莓黄单胞菌,从采集疑似症状植株到检测可在30 min内实现,而且用RPA-LF方法检测疑似样本结果与常规PCR检测方法一致。综上,建立的草莓黄单胞菌RPA-LF检测方法快速、简单、准确、可视化,可用于该病原菌的早期诊断。

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