文献类型： 中文期刊

作者： 钟登科 ¹ ; 黄艺珠 ² ; 魏建超 ² ; 康乐 ² ; 曹瑞兵 ² ; 周斌 ² ; 陈溥言 ³ ;

作者机构： 1.上海农林职业技术学院;南京农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所

2.;上海农林职业技术学院;南京农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所

3.;上海农林职业技术学院;南京农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所;

关键词： 流行性乙型脑炎病毒;多表位疫苗;毕赤酵母;免疫原性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2017 年 06 期

页码： 485-489+507

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)E蛋白多表位疫苗,本研究将人工合成的优化后的E蛋白多表位肽(MP)序列克隆入酵母表达载体p PICZα-A,构建分泌型重组酵母表达质粒p PICZ-MP,经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母X-33,阳性重组子经甲醇诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白(rMP)。通过测定rMP免疫小鼠的抗体水平、抗体亚型、中和抗体和CTL,以评价该多表位疫苗在小鼠模型上的免疫原性。结果表明:成功构建了表达JEV E蛋白多表位抗原的重组酵母菌株X33(pPICZ-MP),能分泌表达多表位肽r MP。纯化后的r MP免疫小鼠产生了较强的体液免疫和细胞免疫反应,其中和抗体水平、CTL活性均与活病毒疫苗组差异不显著(p>0.05),且能保护小鼠免受致死量JEV的攻击。构建的JEV E蛋白多表位疫苗具有良好的免疫原性,能够刺激小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答反应,为流行性乙型脑炎多表位疫苗研制提供新的思路。