文献类型： 中文期刊

作者： 陈秀 ¹ ; 赵昀 ¹ ; 张峰 ¹ ; 彭卫平 ¹ ; 冯晓黎 ¹ ; 黄君霆 ¹ ; 陆长德 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院蚕业研究所,中国科学院上海生物化学研究所

关键词： 家蚕（Bombyx mori．L．）；筛选标记；neo~R；转基因蚕

期刊名称： 生物化学与生物物理学报

ISSN： 0582-9879

年卷期： 1999 年 01 期

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收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 构建含新霉素抗性基因（ｎｅｏｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅ，ｎｅｏＲ）的重组质粒ｐＦＮ，经ＨｉｎｄＩＩ酶切后，用基因枪将ＤＮＡ片段导入家蚕早期受精卵中（Ｇ０代）。孵化的Ｇ１、Ｇ２代蚁蚕均经含新霉素的人工饲料添食２４ｈ后，筛选出新霉素抗性的个体（能正常生长发育的）改为桑叶饲养。于Ｇ２代的５龄第二天从后部丝腺抽提总ＤＮＡ，再以ｎｅｏＲ的ｃＤＮＡ为探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测。结果表明ｎｅｏＲ基因已转入家蚕ＤＮＡ中，获得了含ｎｅｏＲ的转基因蚕。