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伪狂犬病病毒UL36蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 陈玲超 1 ; 王兴娅 1 ; 李俊波 1 ; 李佳佳 1 ; 王晨 1 ; 李松楠 1 ; 王安铖 1 ; 孟鑫 1 ; 童武 1 ; 孔宁 1 ; 于海 1 ; 单同领 1 ; 童光志 1 ; 郑浩 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海兽医研究所;安徽农业大学生命科学院;东北林业大学野生动物学院;安徽农业大学动物科技学院

关键词： 伪狂犬病病毒;UL36基因;VP1/2;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年 54 卷 003 期

页码： 373-378

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 伪狂犬病病毒UL36基因编码的皮层蛋白VP1/2在病毒粒子组装过程中发挥重要作用.本试验以UL36基因为研究对象,将截短的UL36基因克隆入载体pColdI,构建了重组原核表达质粒pColdI-UL36.经诱导表达,将包涵体形式表达的重组蛋白经过变性、亲和层析及复性后获得了纯度较高的蛋白.将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合和间接ELISA方法筛选出1株能稳定分泌针对UL36蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,被命名为UL36-6,抗体亚型鉴定结果为IgG1和κ,制备的腹水抗体中和效价及纯度高,Western-blot和间接免疫荧光试验结果表明单克隆抗体具有很好的特异性.综上所述,本研究成功制备出1株针对PRV UL36蛋白的单克隆抗体,为深入研究UL36蛋白的生物学功能奠定了基础.

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