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天然低共熔溶剂提取米糠酯酶工艺优化及其纯化与酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

作者: 李淑婷 1 ; 邓媛元 1 ; 魏振承 1 ; 张雁 1 ; 唐小俊 1 ; 刘光 1 ; 李萍 1 ; 赵志浩 1 ; 周鹏飞 1 ; 张名位 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所农业农村部功能食品重点实验室广东省农产品加工重点实验室

关键词: 天然低共熔溶剂;提取;响应面法;米糠酯酶;纯化;酶学性质

期刊名称: 食品工业科技

ISSN: 1002-0306

年卷期: 2023 年 006 期

页码: 209-218

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的:采用天然低共熔溶剂(Natural deep eutectic solvents,NADES)提取米糠酯酶并优化提取工艺参数,纯化米糠酯酶获得高纯度米糠酯酶,并探究其酶学特性。方法:合成了10种不同的NADES、选用了水浴搅拌和超声两种处理方式进行筛选,然后对提取效果最佳的NADES和方法进行单因素和响应面优化,参数包括料液比、含水量、提取温度和提取时间;将最优提取工艺得到的粗酶液通过阴离子交换树脂DEAE纯化,然后进行酶学性质的探究。结果:最佳提取米糠酯酶的工艺为在含有5%水分的脯氨酸-甘油(摩尔比1:2)溶剂体系中,水浴搅拌3.0 h,温度74.0℃,米糠和溶剂料液比为9:30,此时米糠酯酶活力为2.96 U。通过阴离子交换树脂DEAE纯化,获得了纯度较高的米糠酯酶,纯化倍数为1.74倍,回收率为69.40%,分子量约为35 kDa,对硝基苯酚乙酯为最适底物,最适温度和pH分别是40.0℃、pH8.0,在30.0~40.0℃和pH7.0~9.0时米糠酯酶均保持良好的稳定性。氯化胆碱-甘油、脯氨酸-甘油两种NADES对米糠酯酶的活力有较好的维持作用。结论:天然低共熔溶剂提取方式是一种简单、绿色的提取方式,可为生物活性化合物的绿色提取研究提供一些参考。

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