文献类型： 中文期刊

作者： 谭书桢 ¹ ; 董虎 ¹ ; 潘颂佳 ¹ ; 穆素雨 ¹ ; 陈永杰 ¹ ; 张韵 ¹ ; 孙世琪 ¹ ; 郭慧琛 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 重链抗体可变区抗体;信号肽;密码子优化;表达

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2024 年 40 卷 011 期

页码： 4219-4227

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 重链抗体可变区抗体(variable domain of heavy-chain antibody, VHH)已被广泛用于药物治疗、诊断和研究。大肠杆菌是生产VHH最常用的表达系统，但可能会导致VHH的生物活性降低。哺乳动物细胞是目前最理想的VHH表达宿主之一。本研究通过优化VHH的信号肽(signal peptide,SP)和密码子，以期提高VHH在Expi293F细胞中的产量。VHH1-Fc被用于筛选SP，通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)筛选出的SP IFN-α2分泌效果最佳；通过提高基因的GC3和GC含量，VHH1的产量提高了约1倍，且对VHH1与A型塞内卡病毒(Senecavirus A, SVA)的结合活性无明显影响；其他5种重组VHHs分别连接SP IFN-α2并进行密码子优化，其平均产量大于191.6mg/L。此外，这些VHHs在培养上清中具有高纯度和高回收率的优点。本研究证实SP IFN-α2和密码子优化可以在Expi293F细胞高效表达VHH，为VHH的大规模生产提供了参考。